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Q&A 基因组提取常见问题分析

发表于:2010-11-18 10:52:35    点击率:3090

洗脱产物dna量很少或没有
  a-1 样品中细胞或病毒浓度低
      ——
富集细胞或病毒
  a-2
样品裂解不充分
      ——
裂解液和样品混合不均匀造成的细胞裂解不充分,建议间歇性涡旋1-2
      ——
蛋白酶k活性下降造成的细胞裂解不充分
      ——
温浴时间不够造成的细胞裂解不充分或蛋白降解不完全,尽量把组织切成
         
小块,延长温浴时间,使裂解物中没有颗粒状物残留。
  a-3 dna
吸附不充分
      ——
在上柱前,裂解物中没加乙醇,或用低浓度乙醇代替无水乙醇
  a-4
洗脱缓冲液ph值偏低
      ——
ph值到8.0-8.3之间。

q dna影响后续酶反应实验
  a-1 乙醇残留
      ——
在洗脱液中有残留的漂洗液pw,可通过空甩吸附柱3-5min后置于室温或
          50℃
温箱1-2min彻底去除。

q dna降解
  a-1 样本不新鲜
      ——
提阳性样本dna,通过对比确定样本中dna是否完整
  a-2
前处理不当
      ——
液氮研磨过度或回潮;样本量过大。

 

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